『赤塚不二夫 生誕80周年企画』を記念し、彼の代表作の1つである『おそ松くん』を元にしたスピンオフ作品です。アニメ化は1988年に放送されたアニメ版(第2作目)から27年ぶり且つ3度目となっており、現時点では第1期(2015年10月6日〜2016年3月29日)・第2期(2017年10月3日～2018年3月27日)・第3期(2020年10月13日〜2021年3月30日)と劇場版1作が制作されています。本作では6つ子達が大人に成長したという設定でオリジナルストーリーをメインにしつつ、原作の一部設定の踏襲やエピソードのリメイク版も展開しています。その為、本作は『おそ松くん』の外伝的な存在となっています。

F6チョロ松は、6つ子の三男で、ハーバード大学の准教授を務めるビューティージーニアスです。インテリを醸し出しており、ヒエログリフをマスターしようとしています。暴走する兄弟を抑える真面目な性格ですが、女子に話しかけられるとポンコツな一面が露わになる所も健在しています。一人称は基本的に"私"ですが、赤面して焦った時などには通常時と同じ"僕"になる事もあります。

6つ子の長男及びF6のリーダーで、爽やかジャスティスです。彼らの中ではベーシックなイケメンとなっています。1日の多忙なスケジュールもウインクでオールキャンセル可能です。また、通常時よりも落ち着きが増しており弟達を率いる雰囲気が感じられます。一人称は基本的に"僕"ですが、強気な場面では通常時と同じ"俺"になる事もあります。

忍者シコ松とは、アニメ『おそ松さん』19話Aパートのシチュエーションコント集「時代劇おそ松さん」の一作で、チョロ松が演じているキャラクターです。

「十四松パン」とは、アニメ「おそ松さん」第17話「十四松まつり」内のショートアニメのタイトルで、同タイトルに登場した主人公です。「ピーターパン」のパロディでになっています。

6つ子の四男で、カリスマ的求心力のミステリアスクールです。400年前にとある帝王から世界を救った王家の末裔と言われています。しかし、皆が騒ぐ中で1人だけ休むマイペースさや1番体力切れが早い一面もあります。

お姉さんタイプで、じょし松のリーダーです。モテるために、年上の余裕、同期の気安さ、年下の可愛さを演出し努力します。可愛いメイクをする女子や、それに騙される男などに毒を吐き、リボ払いがきつくて金欠気味です。

爆弾処理班一松は、アニメ「おそ松さん」内の「十四松と爆弾」に登場するキャラクターで、ビルに設置された時限爆弾のタイムリミットが刻一刻と迫る中、一松警部とトド松警部補の前にあらわれます。かわいらしいビジュアルがファンの間で密かに人気を集めています。

アニメ「おそ松さん」第17話「十四松まつり」内のショートアニメ「十四松パン」に登場した、ティンカーベルに扮した一松の名前で、手のひらサイズの体に松ぼっくりのような衣装を着ています。十四松パンが連れてきたトト子に嫉妬しブス呼ばわりしていました。

リア獣イチゲルゲとは、アニメ「おそ松さん」のBD・DVD第1巻（第一松）収録の3.5話「童貞なヒーロー」に登場する"童貞自警団新品ブラザーズ"のメンバー"新品の一松"が妬のあまり、化け物に成り果てた姿です。

見た目はドロドロとした紫色の巨大なナメクジで、胸元には松マークがついています。瞳孔が開き瞳は紫色。背中にジッパーがあり、尻尾の先端にはなぜかパソコンがついており、登場するや否や口から緑色の液体を吐き散らし、その後も絶えずよだれを垂らしています。

橋本にゃーは、チョロ松が応援している地下アイドル。作中では主に"にゃーちゃん"という愛称で呼ばれています。碧眼に下がり眉、ピンク髪に緑色のメッシュが入ったロングヘアーと、猫耳、尻尾、猫グローブが特徴。ライブ中はブレザーやリボンタイ、ミニスカート、ブーツを身に付けています。

アイドルなだけあってかなり可愛いが、おそ松からは"結構普通"や"クラスに居るレベル"と言われています。

エスパーニャンコは、第5話Bパート「エスパーニャンコ」に登場したキャラクターです。デカパン博士の飼いネコが、ビビビの一発で人間の本当のこころがわかる超能力を手に入れます。口では「すき」といっていても、「きらい」と見抜くエスパーぶりを発揮しています。

F6は『おそ松さん』に登場するキャラクターで、ビックリする程ルックスが良くなった6つ子のグループ名称です。F6カラ松は、6つ子の次男で、肉を肉で巻いて食べる肉食系肉です。一人称も通常時と同じ"オレ"ですが、厳密には制服をかなり着崩すワイルドな俺様系やドSな性格になっています。ただし、優しい一面も健在です。